1、溶解氧

冬季所取的樣品由于試驗(yàn)溫度設(shè)在20℃，使得溶解氧過飽和，夏季所取的樣品在20℃時(shí)溶解氧可能欠飽和。在BOD5測定前應(yīng)對這些樣品進(jìn)行攪拌和曝氣，以便使溶解氧調(diào)節(jié)到20℃飽和點(diǎn)左右。

2、pH

應(yīng)調(diào)節(jié)試驗(yàn)水樣的pH值為6.7～7.5（zui佳點(diǎn)為pH7.2），BOD5讀數(shù)下降可能是由于正在試驗(yàn)樣品的pH值超出了這個(gè)范圍，含有大量酸或堿的樣品，BOD5讀數(shù)可能會(huì)低于實(shí)際含量。

酸性或堿性水樣應(yīng)用適當(dāng)濃度的Na0H或H2S04中和。

如果工業(yè)廢水中含有酸性或鹽的氧化物，或者需要高倍稀釋，對標(biāo)準(zhǔn)五日BOD5測定，可使用pH7.2的磷酸緩沖液作為稀釋劑。

3、溫度

實(shí)驗(yàn)時(shí)將攪拌器放置在20℃±１℃的培養(yǎng)箱中。BOD的測定也能超出這一溫度范圍，例如，在35℃或37℃時(shí)，測定BOD所需要的時(shí)間可以分別縮短為2.5天或34小時(shí)，其測定結(jié)果與五日20℃相似。提高溫度所獲得的BOD值與五日20℃條件下測定的結(jié)果有很好的相關(guān)性。

如果在采樣時(shí)樣品溫度超過20℃，或樣品溫度不足20℃，可將樣品放在培養(yǎng)箱中恒溫。在樣品測定前要求對樣品進(jìn)行處理。

4、稀釋

儀器測定范圍為0～1000mg/L。如果試驗(yàn)樣品的BOD5估計(jì)值高于1000mg/L可用稀釋水稀釋樣品。所加入的稀釋水也應(yīng)保持為20℃，并曝氣使氧達(dá)到飽和，如需要若干份相同的樣品試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)稀釋足夠量的原水樣，并從稀釋樣中取出與量程對應(yīng)的體積。例如，當(dāng)試驗(yàn)原水樣稀釋兩倍時(shí)，稀釋倍數(shù)為2；當(dāng)原水樣按1∶10稀釋時(shí)，則稀釋倍數(shù)為10。

5、接種

什么是接種

BOD5實(shí)驗(yàn)要求水樣含有供生物氧化的有機(jī)物和適量的氧化有機(jī)物的需氧細(xì)菌，以及吞食有機(jī)物和增進(jìn)需氧細(xì)菌生長的其他微生物。如果水樣中根本沒有或幾乎沒有這類微生物，就必須對水樣按一定比例加入這類微生物溶液。這個(gè)過程應(yīng)稱之為接種。

與生活污水不同，工業(yè)廢水可能不含有足夠量的細(xì)菌以供樣品中所含有機(jī)物完全的生化分解，如果所測定的樣品就是這種廢水，應(yīng)加入接種溶液。

6、接種方法

制備接種溶液

用于接種的溶液為20℃放置24～36小時(shí)的未經(jīng)處理新鮮生活污水的上清液。

在下次實(shí)驗(yàn)中，若要使用以前測定過的水樣作為接種液應(yīng)經(jīng)濾紙過濾，這種濾液在冷藏（約20℃）、避光的條件下保存，一般在二個(gè)月內(nèi)可能是有效的。

將準(zhǔn)備測定的樣品放入培養(yǎng)瓶中，使用吸管將2～5滴接種液加入到樣品中（根據(jù)樣品量）。按步驟測定BOD5，五日后獲得的讀數(shù)可以作為試驗(yàn)樣品真實(shí)的BOD5值。

注意：當(dāng)使用上述方法接種時(shí)。不必校正接種的BOD5讀數(shù)。因?yàn)樗尤虢臃N液的量相對水樣量來說太少，不致于影響BOD5的讀數(shù)。如果上述方法未能引起水樣中有機(jī)物的生物分解，可增加所加入接種液的量。如果由于接種液的加入影響了BOD5測定儀的讀數(shù)，可將接種液與樣品同時(shí)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行平行樣測定。

接種量常取1％，5％，10％三種。