一：揮發(fā)性有機(jī)物及氰化物毒性浸出

作業(yè)指導(dǎo)規(guī)范：

1 試劑

1.1 試劑水：使用符合待測物分析方法標(biāo)準(zhǔn)中所要求的純水。

2 浸提劑

2.1浸提劑2#：試劑水，用于測定氰化物和揮發(fā)性有機(jī)物的浸出毒性。

3 儀器設(shè)備

3.1 振蕩設(shè)備：轉(zhuǎn)速為30±2r/min 的翻轉(zhuǎn)式振蕩裝置（GGC-W翻轉(zhuǎn)式振蕩器）。

3.2 提取容器，零頂空提取器（Zero-Headspace Extraction Vessel，以下簡稱ZHE）：500ml，用于樣品中揮發(fā)性物質(zhì)浸出的專用裝置。

4 過濾裝置

4.1 零頂空提取器（ZHE）：分析樣品中的揮發(fā)性物質(zhì)，采用ZHE 進(jìn)行過濾。

4.2濾膜：微孔濾膜，孔徑0.8μm，直徑：90mm.

4.3 ZHE 浸出液采集裝置：采用玻璃
制作的500ml注射器采集初始液相或終的浸出液。

4.4 ZHE 浸提劑轉(zhuǎn)移裝置：可以使用任何不改變浸提劑性質(zhì)的導(dǎo)入設(shè)備流體計(jì)量泵。

4.5存儲(chǔ)裝置：TEDLAR采樣袋

5 實(shí)驗(yàn)設(shè)備

5.1實(shí)驗(yàn)天平：精度為±0.01g。

5.2 燒杯或錐形瓶：玻璃，500ml。

5.3 表面皿：直徑可蓋住燒杯或錐形瓶。

5.4 篩：涂Teflon 的篩網(wǎng)，孔徑9.5mm。

5.5高壓氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量）

5.6恒溫干燥箱

5.7土壤研磨機(jī)

5.8冰箱

6 、樣品的保存和處理：
除非冷藏會(huì)使樣品性質(zhì)發(fā)生不可逆改變，樣品應(yīng)于4°C 冰箱冷藏保存。

二：浸出步驟：

一、樣品無初始液相：（指的是干質(zhì)量的采集樣品，看不到明顯的液體，）

1、取樣品100g測定樣品含水率，稱取100g樣品置于具蓋容器中，于105℃下烘干，恒重至兩次稱量值的誤差小于±1%，計(jì)算樣品含水率，含水率測定公式= (濕重-干重)/濕重 * 100%，例如：稱取100g 于105℃下烘干，恒重至兩次后的重量為90g，則此次采集樣品中含水率則為（100-90）/100*100=10%（一般測定含水率的樣品不能在進(jìn)行毒性浸出試驗(yàn)）.

2、樣品用土壤研磨機(jī)破碎樣品顆粒應(yīng)可以通過9.5mm 孔徑的篩，對(duì)于粒徑大的顆?？赏ㄟ^破碎、切割或碾磨降低粒徑。因?yàn)闇y定的是揮發(fā)性有機(jī)物，為避免過篩時(shí)有待成分揮發(fā)，應(yīng)用刻度尺測量粒徑，樣品和降低粒徑工具需要冷卻。

3、(1)將零空間萃取器的頂蓋旋緊，用PU管把零空間萃取器與氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量）連接好,緩慢加壓，直到活塞頂?shù)搅憧臻g萃取器上蓋，把上蓋取下，然后再把活塞取下來，再以蒸餾水潤濕零空間萃取器筒壁。

(2)將活塞由頂層平衡放入零空間萃取器中，向下推至距上蓋1cm處（目的是要讓萃取器里面有足夠的空間盛放樣品）。

4、將30g新樣品(指沒有進(jìn)行過含水率測試并且冷卻至4℃的樣品)倒入零空間萃取器中，然后放上一個(gè)不銹鋼濾網(wǎng)，把用超純水潤濕過的微孔濾膜（90mm）放入個(gè)鋼制濾網(wǎng)的上面（微孔濾膜無正反面），然后放上第二個(gè)濾網(wǎng)，要同心放置，防止錯(cuò)位。

5、放上蓋子，用工具把4個(gè)螺絲旋緊固定好，要特別注意在旋緊的過程中不能把其中一個(gè)螺絲旋到緊再去旋其他螺絲，要跟上法蘭盤似的4個(gè)逐漸旋緊，防止造成空隙而漏氣；

6、根據(jù)樣品含水率10%，計(jì)算出30g樣品中含水量為（30g*10%=3g）, 從而算出30g新樣品中干固體的重量為30g-3g=27g然后按照液固比為10：1（l/kg）計(jì)算出浸提劑的體積（即270ml），打開底層排氣閥及頂層開關(guān)閥，頂層開關(guān)接上流體計(jì)量泵，調(diào)整流速后將電源插上，此時(shí)便開始輸入浸提劑。

7、輸送完畢后拔掉輸送泵電源插頭，關(guān)閉頂層開關(guān)閥并將管路取下，靜置10分鐘左右，把零空間萃取器上下閥門都關(guān)閉，零空間萃取器下面氣嘴與氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量）用PU管連接好，把氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量）上面的閥門打開，然后再打開零空間萃取器下面的閥門，開始用氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量）給零空間萃取器加壓，看零空間萃取器壓力表數(shù)值達(dá)到20psi就停止加壓，關(guān)閉零空間萃取器下面閥門，撤掉氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量），這時(shí)把零空間萃取器上面氣嘴連上一節(jié)硅膠管，輕輕旋動(dòng)閥門上的黑色旋鈕（注意：一定要輕輕旋動(dòng)）當(dāng)看到硅膠管看到出現(xiàn)水柱時(shí)（說明零空間萃取器里面的空氣已經(jīng)全部頂出），迅速旋動(dòng)黑色旋鈕，關(guān)閉閥門.

8、將零空間萃取器固定在翻轉(zhuǎn)振蕩器上，注意應(yīng)以十字形對(duì)稱方式放置，并注意底層零件于旋轉(zhuǎn)時(shí)不會(huì)碰撞到其他物品，且周圍環(huán)境不會(huì)妨礙旋轉(zhuǎn)器的操作。并以30±2轉(zhuǎn)/min的速度振蕩18±2h。

9、翻轉(zhuǎn)振蕩器時(shí)間的設(shè)定：在主機(jī)定時(shí)器上有小時(shí)，分，秒標(biāo)志，可通過總定時(shí)器上的“十”“一”按鈕任意設(shè)定，根據(jù)自己需要設(shè)定萃取時(shí)間。如18小時(shí)設(shè)定，只須按動(dòng)定時(shí)器下方中間按鈕把標(biāo)志定在H上，通過左側(cè)按鈕設(shè)為1，第二按鈕設(shè)為8，右側(cè)兩個(gè)按鈕均設(shè)為0即可，（2）總時(shí)間定好之后再設(shè)定正反轉(zhuǎn)定時(shí)器，正反轉(zhuǎn)定時(shí)器時(shí)間設(shè)定與總定時(shí)時(shí)間設(shè)定方式大致一樣，只是正反轉(zhuǎn)定時(shí)器前兩位數(shù)字為間隔時(shí)間，后兩位數(shù)字為工作時(shí)間，如設(shè)計(jì)間隔時(shí)間為5S，工作時(shí)間為9小時(shí)，只需將前兩位設(shè)定為05S后兩位設(shè)定為09H即可，千萬不可以將間隔時(shí)間與工作時(shí)間設(shè)定為零，儀器正常啟動(dòng)前請(qǐng)放下儀器正面卡扣，儀器工作期間工作人員千萬不可靠近儀器轉(zhuǎn)動(dòng)部分，打開電源開關(guān)，將電機(jī)調(diào)速器調(diào)至一個(gè)合適的翻轉(zhuǎn)頻率，不要太快也不要太慢即可，大約調(diào)至90左右即可，因?yàn)殡姍C(jī)速比為3:1，所以調(diào)速器調(diào)至90即為每分30轉(zhuǎn)，首次開機(jī)大約20秒左右，好開蓋放氣，中途如需再放氣只須按暫停開關(guān)開蓋放氣即可。

10、實(shí)驗(yàn)完畢后把零空間萃取器取下，頂層開關(guān)閥打開并接上氣密式注射器，從底層緩慢加壓，讓浸出液從零空間萃取器中緩慢流入氣密式注射器中，上述動(dòng)作一直持續(xù)到頂層出口不在冒出液體后，關(guān)閉頂層開關(guān)并拔掉底層的快速氣體插頭，此時(shí)整個(gè)過濾完成。將氣密式注射器中的液體儲(chǔ)存并待分析。

二 、樣品有初始液相：（指的是干濕質(zhì)量的采集樣品，看到明顯的固體和液體）

1、含有初始液相樣品進(jìn)行含水率測定的時(shí)候需要先將樣品進(jìn)行過濾之后測定濾渣的含水率與干固體百分率。

2、具體測量方式如下：

（1）將零空間萃取器的頂蓋旋緊，用PU管把零空間萃取器與氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量）連接好,緩慢加壓，直到活塞頂?shù)搅憧臻g萃取器上蓋，把上蓋取下，然后再把活塞取下來，再以蒸餾水潤濕零空間萃取器筒壁。

（2）將活塞由頂層平衡放入零空間萃取器中，向下推至距上蓋1cm處（目的是要讓萃取器里面有足夠的空間盛放液體），再將底層鎖緊。

（3）比如：將100g含有初始液相樣品倒入零空間萃取器中，然后放上一個(gè)不銹鋼濾網(wǎng)，把用超純水潤濕過的微孔濾膜（90mm）放入個(gè)鋼制濾網(wǎng)的上面（微孔濾膜無正反面），然后放上第二個(gè)濾網(wǎng)，要同心放置，防止錯(cuò)位。

(4)、放上蓋子，用三個(gè)螺絲旋緊固定好，要特別注意在旋緊的過程中不能把其中一個(gè)螺絲旋到緊再去旋其他螺絲，要跟上法蘭盤似的四個(gè)逐漸旋緊，防止造成空隙而漏氣；

(5)、將零空間萃取器頂層開關(guān)閥打開并接上氣密式注射器，零空間萃取器與氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量）連接好，從底層緩慢加壓，讓液體從萃取器中緩慢流入氣密式注射器中，上述動(dòng)作一直持續(xù)到頂層出口不在冒出液體后，關(guān)閉頂層開關(guān)并拔掉底層的快速氣體插頭，此時(shí)過濾完成。

3、將過濾完的濾渣至于具蓋容器中，于105℃下烘干，恒重至兩次稱量值的誤差小于±1%，計(jì)算樣品含水率與干固體百分率。例如：100g樣品過濾完濾渣含量為60g,烘干恒重完為50g,則根據(jù)①含水率=(濾渣濕重-濾渣干重)/濾渣濕重 * 100%即(60g-50g)/60*100%=16%,②干固體百分率=濾渣干重/過濾前樣品的總重量*100%即50/100*100%=50%

4、測定干固體百分率≦9%，則直接分析玻璃注射器中的液體即可。

5、如果說之前測定干固體百分率＞9%，（以上測的干固體百分率為50% 是大于9%的）則還需要進(jìn)行以下的實(shí)驗(yàn)步驟：（一般測定含水率的樣品不能在進(jìn)行浸出毒性試驗(yàn)）.

（1）、取70克新樣品，用零空間萃取器與濾膜對(duì)樣品進(jìn)行 過濾，具體方法同前。將過濾完初始液相在氣密式注射器或梯拉德采樣袋放入冰箱4℃冷卻保存。

（2）、根據(jù)之前測定樣品含水率16%計(jì)算中濾渣30g中的含水量（即30g*16%=4.8g，從而算出30g濾渣中干固體的重量為30g-4.8g=25.2g然后按照液固比為10：1（L/kg）計(jì)算出浸提劑的體積（即252ml）打開底層排氣閥及頂層開關(guān)閥，頂層開關(guān)接上流體計(jì)量泵，調(diào)整流速后將電源插上，此時(shí)便開始輸入浸提劑。

6、輸送完畢后拔掉輸送泵電源插頭，關(guān)閉頂層開關(guān)閥并將管路取下，靜置10分鐘左右，把零空間萃取器上下閥門都關(guān)閉，零空間萃取器下面氣嘴與氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量）用管子連接好，把氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量）上面的閥門打開，然后再打開零空間萃取器下面的閥門，（注意：零空間萃取器上面閥門一定要關(guān)閉）。開始用氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量）給零空間萃取器加壓，看零空間萃取器壓力表數(shù)值達(dá)到20psi就停止加壓，關(guān)閉零空間萃取器下面閥門，撤掉氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣體流量），這時(shí)把零空間萃取器上面氣嘴連上一節(jié)硅膠管，輕輕旋動(dòng)閥門上的黑色旋鈕（注意：一定要輕輕旋動(dòng)）當(dāng)看到硅膠管看到出現(xiàn)水柱時(shí)（說明零空間萃取器里面的空氣已經(jīng)全部頂出），迅速旋動(dòng)黑色旋鈕，關(guān)閉閥門.

7、將零空間萃取器固定在翻轉(zhuǎn)振蕩器上，注意應(yīng)以十字形對(duì)稱方式放置，并注意底層零件于旋轉(zhuǎn)時(shí)不會(huì)碰撞到其他物品，且周圍環(huán)境不會(huì)妨礙旋轉(zhuǎn)器的操作。并以30±2轉(zhuǎn)/min的速度振蕩18±2h。

8、翻轉(zhuǎn)式振蕩器時(shí)間的設(shè)定：在主機(jī)定時(shí)器上有小時(shí)，分，秒標(biāo)志，可通過總定時(shí)器上的“十”“一”按鈕任意設(shè)定，根據(jù)自己需要設(shè)定萃取時(shí)間。如18小時(shí)設(shè)定，只須按動(dòng)定時(shí)器下方中間按鈕把標(biāo)志定在H上，通過左側(cè)按鈕設(shè)為1，第二按鈕設(shè)為8，右側(cè)兩個(gè)按鈕均設(shè)為0即可，（2）總時(shí)間定好之后再設(shè)定正反轉(zhuǎn)定時(shí)器，正反轉(zhuǎn)定時(shí)器時(shí)間設(shè)定與總定時(shí)時(shí)間設(shè)定方式大致一樣，只是正反轉(zhuǎn)定時(shí)器前兩位數(shù)字為間隔時(shí)間，后兩位數(shù)字為工作時(shí)間，如設(shè)計(jì)間隔時(shí)間為5S，工作時(shí)間為9小時(shí)，只需將前兩位設(shè)定為05S后兩位設(shè)定為09H即可，千萬不可以將間隔時(shí)間與工作時(shí)間設(shè)定為零，儀器正常啟動(dòng)前請(qǐng)放下儀器正面卡扣，儀器工作期間工作人員千萬不可靠近儀器轉(zhuǎn)動(dòng)部分，打開電源開關(guān)，將電機(jī)調(diào)速器調(diào)至一個(gè)合適的翻轉(zhuǎn)頻率，不要太快也不要太慢即可，大約調(diào)至90左右即可，因?yàn)殡姍C(jī)速比為3:1，所以調(diào)速器調(diào)至90即為每分30轉(zhuǎn)，首次開機(jī)大約20秒左右，好開蓋放氣，中途如需再放氣只須按暫停開關(guān)開蓋放氣即可。

9、旋轉(zhuǎn)初期的30分鐘內(nèi)，需開關(guān)底層排氣閥數(shù)次，以排除旋轉(zhuǎn)初期產(chǎn)生過大的壓力。然后便開始進(jìn)行18小時(shí)的萃取。

10、萃取完成后，將零空間萃取器頂層接上氣密式注射器，并打開閥門，零空間萃取器與氮?dú)怃撈浚ɑ驘o油空氣壓縮機(jī)，易于控制壓力及氣量）連接好，從底層緩慢加壓，讓浸出液從零空間萃取器中緩慢流入氣密式注射器中，上述動(dòng)作一直持續(xù)到頂層出口不在冒出液體后，關(guān)閉頂層開關(guān)并拔掉底層的快速氣體插頭，此時(shí)過濾完成。對(duì)零空間萃取器進(jìn)行第二次加壓收集濾液。

11、將次與第二次收集的液體進(jìn)行混合，并將濾液注射到TEDLAR采樣袋進(jìn)行冷藏保存待分析即可。