一．分光光度法是環(huán)境監(jiān)測(cè)中常用的方法，分光光度法的主要特點(diǎn)：

 (1) 靈敏度高；

 (2) 準(zhǔn)確度高：   

 (3) 適用范圍廣；

 (4) 操作簡(jiǎn)便、快速：

 (5) 價(jià)格低廉。

二．校正分光光度計(jì)波長(zhǎng)的方法：

校正波長(zhǎng)一般使用分光光度計(jì)光源中的穩(wěn)定線光譜或有穩(wěn)定亮線的外部光源，把光束導(dǎo)入光路進(jìn)行校正，或者測(cè)定已知光譜樣品的光譜，與標(biāo)準(zhǔn)光譜對(duì)照進(jìn)行校正。

三．分光光度法測(cè)定樣品時(shí)，選用比色皿應(yīng)該考慮的主要因素：

 (1) 測(cè)定波長(zhǎng)。比色液吸收波長(zhǎng)在370nm以上時(shí)可選用玻璃或石英比色皿，在370nm以下時(shí)必須使用石英比色皿；

 (2) 光程。比色皿有不同光程長(zhǎng)度，通常多用10.0mm的比色皿，選擇比色皿的光程長(zhǎng)度應(yīng)視所測(cè)溶液的吸光度而定，以使其吸光度在0.1～0.7之間為宜。

四．如何檢查分光光度計(jì)的靈敏度：

靈敏度是反映儀器測(cè)量性能的重要指標(biāo)，檢查方法為：配制0.001％重鉻酸鉀溶液，用1cm比色皿裝入蒸餾水作參比，于440nm處測(cè)得的吸光度應(yīng)大于0.010。若示值＜0.010，可適當(dāng)增加靈敏度的擋數(shù)，如仍不能達(dá)到該值，應(yīng)檢查或更換光電管。

五．在光度分析中，消除共存離子的干擾的方法：

 (1) 盡可能采用選擇性高、靈敏度也高的TX試劑；

 (2) 控制酸度，使干擾離子不產(chǎn)生顯色反應(yīng)；

 (3) 加入掩蔽劑，使干擾離子被絡(luò)合而不發(fā)生干擾，而待測(cè)離子不與掩蔽劑反應(yīng)；

 (4) 加入氧化劑或還原劑，改變干擾離子的價(jià)態(tài)以消除干擾；

 (5) 選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)以消除干擾：

 (6) 萃取法消除于擾；

 (7) 其他能將被測(cè)組分與雜質(zhì)分離的步驟，如離子交換、蒸餾等；

 (8) 利用參比溶液消除顯色劑和某些有色共存離子干擾；

 (9) 利用校正系數(shù)從測(cè)定結(jié)果中扣除干擾離子影響。

六．用分光光度法測(cè)定樣品時(shí)，什么情況下可用溶劑作空白溶液?

當(dāng)溶液中的有色物質(zhì)僅為待測(cè)成分與顯色劑反應(yīng)生成，可以用溶劑作空白溶液，簡(jiǎn)稱溶劑空白。

七．一臺(tái)分光光度計(jì)的校正應(yīng)包括哪4個(gè)部分?

波長(zhǎng)校正：吸光度校正；雜散光校正；比色皿校正。

八．在光度分析中酸度對(duì)顯色反應(yīng)主要有哪些影響?

 (1) 對(duì)顯色劑本身的影響；

 (2) 對(duì)溶液中各元素存在狀態(tài)的影響；

 (3) 對(duì)顯色反應(yīng)的影響。

九．簡(jiǎn)述朗伯-比爾定律A=kcL的基本內(nèi)容，并說(shuō)明式中各符號(hào)的含義：

朗伯—比爾定律是比色分析的理論基礎(chǔ)，它可綜合為光的吸收定律，即當(dāng)一束單色光通過(guò)均勻溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度和液層厚度的乘積成正比。

式中：A—吸光度； k—吸光系數(shù)； C—待測(cè)物濃度； L—液層厚度。

十．簡(jiǎn)述在朗伯-比爾定律中，吸光系數(shù)與摩爾吸光系數(shù)的區(qū)別。

在朗伯-比爾定律A=kcL中，K是比例常數(shù)，它與入射光的波長(zhǎng)、溶液的性質(zhì)有關(guān)。如果有色物質(zhì)溶液的濃度c用g／L表示，液層厚度以cm表示，比例常數(shù)眾稱為吸光系數(shù)。如果濃度c用mol／L表示，液層厚度以cm表示，則比例常數(shù)k稱為摩爾吸光系數(shù)。摩爾吸光系數(shù)的單位為L／(mol·cm) ，它表示物質(zhì)的濃度為1mol／L、液層厚度為1cm時(shí)溶液的吸光度。

十一．在光度分析中如何用鐠釹濾光片對(duì)光度計(jì)的波長(zhǎng)進(jìn)行校正。

用特制的鐠釹濾光片 (預(yù)先在精密度較高的儀器上進(jìn)行校正過(guò)) 校正儀器波長(zhǎng)時(shí)，通常用573nm和586nm的雙峰譜線校正。

十二．在光度分析中如何選擇顯色劑。

 (1) 顯色劑的靈敏度要高；

 (2) 顯色劑的選擇性要好；

 (3) 所形成的有色化合物應(yīng)足夠穩(wěn)定，而且組成恒定，有確定的組成比；

 (4) 所形成的有色化合物與顯色劑之間的差別要大；

 (5) 其他因素如顯色劑的溶解度、穩(wěn)定性、價(jià)格等。

十三．在光度分析中共存離子的干擾主要的情況：

 (1) 共存離子本身有顏色影響測(cè)定；

 (2) 共存離子與顯色劑生成有色化合物，同待測(cè)組分的有色化合物的顏色混在一起；

 (3) 共存離子與待測(cè)組分生成絡(luò)合物降低待測(cè)組分的濃度而干擾測(cè)定；

 (4) 強(qiáng)氧化劑和強(qiáng)還原劑存在時(shí)因破壞顯色劑而影響測(cè)定。

十四．在光度分析中引起偏離光吸收定律的原因：

 (1) 由于入射光單色性差而引起偏離：

 (2) 由于溶液中的化學(xué)變化而引起偏離 (待測(cè)物質(zhì)離解、締合) ；

 (3) 由于介質(zhì)的不均勻性而引起偏離。